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ThioliteGreen硫醇化合物绿色荧光探针

Thiolite  Green硫醇化合物绿色荧光探针是美国AAT Bioquest生产的荧光探针,Thiolite Green是用于测量硫醇化合物的*灵敏的荧光探针之一。与硫醇化合物(例如半胱氨酸)反应时,会生成绿色荧光加合物。它可用于定量蛋白质上的半胱氨酸数量。我们用它来荧光测量谷胱甘肽。与含硫醇的化合物反应后,其荧光增强> 200倍。齐岳生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供*优质的Thiolite  Green硫醇化合物绿色荧光探针。 

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产品说明书

操作步骤

1.准备Thiolite Green 工作溶液:

1.1在高品质无水DMSO中准备10至25 mM的Thiolite Green 储备溶液。储备溶液应及时使用;任何剩余的溶液均需等分并冷冻在-20℃。

注意:未使用的Thiolite Green储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在-20oC下避光保存。

1.2准备一个2X Thiolite 绿色 工作溶液:在实验的当天,要么溶解Thiolite 绿色 在DMSO或解冻的等分试样Thiolite 绿色 原液至室温。在pH值为20的20 mM Hepes缓冲液或您选择的缓冲液中,制备终浓度为100至250 µM的2X工作溶液,建议使用终浓度为50至100 µM的Thiolite Green 来测量硫醇溶液浓度。

 

2.在上清液中进行GSH分析:

2.1向GSH 标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL 2X Thiolite Green 工作溶液(来自步骤1.2),使GSH 测定总体积为100 µL /孔。

注意:对于384孔板,将25 µL样品和25 µL GSH反应混合物加到每个孔中。

2.2在避光的条件下,将反应在室温下孵育10至60分钟。

2.3用荧光板读数器在Ex / Em = 490/525 nm处监测荧光的增加。

2.4使用空白孔(仅使用测定缓冲液)中的荧光作为对照,并通过硫醇反应从这些孔的值中减去。

 

参考文献

Gas Chromatography/Mass Spectrometry-Based Metabolomic Profiling Reveals Alterations in Mouse Plasma and Liver in Response to Fava BeansAuthors: Man Xiao, Guankui Du, Guobing Zhong, Dongjing Yan, Huazong Zeng, Wangwei CaiJournal: PloS one (2016): e0151103

Virus-like particles with removable cyclodextrins enable glutathione-triggered drug release in cellsAuthors: Kenichi Niikura, Naotoshi Sugimura, Yusuke Musashi, Shintaro Mikuni, Yasutaka Matsuo, Shintaro Kobayashi, Keita Nagakawa, Shuko Takahara, Chie Takeuchi, Hirofumi SawaJournal: Molecular biosystems (2013): 501--507

荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轮双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上,利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染,操作简便等优点,使得荧光标记物在许多研究领域的应用日趋广。

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本文由齐岳Lh整理,2022-07-26 09:42:38

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